外泌体验证产品
随机光学重构显微术指的是利用能在荧光态和暗状态之间不断切换的荧光探针标记待观察分子,任何一帧荧光像只探测一小部分光学上可分辨的荧光基团,因此能非常精确地确定它们离荧光光斑中心位置的一种超高分辨率荧光显微术。虽然每一帧捕捉到的只是随机的一部分荧光基团,但重建多帧样品的荧光像便最终给出一帧超高分辨率的荧光成像。
该系统适合在固定的细胞或组织样本中对蛋白和核酸等分子的空间分布进行高精度测绘,同时,使用特定方法,也可在活细胞中进行蛋白超分辨定位、单分子高精度追踪等实验。 STORM超高分辨显微成像系统具有目前光学显微镜中最高的分辨率,XY轴最高分辨率 ≤20nm,Z轴最高分辨率 ≤50nm,因此非常适合用来做外泌体检测。
技术流程
交付成果
项目优势
该系统可以探究微小体积下分子间的相互作用,可对外泌体所携带的蛋白进行共定位,有助于解决单个外泌体上所携带生物信息的解析。
外泌体在机体的免疫应答、抗原提呈、细胞迁移、细胞分化、肿瘤侵袭等方面发挥关键作用,研究表明不同细胞来源的外泌体所含有的RNA和蛋白成分不尽相同,可作为多种疾病的早期诊断标记物。华然腾创提供包括细胞检测,培养,细胞凋亡,细胞增殖,细胞周期,细胞迁移/侵袭等体外细胞实验服务。
实验流程
实验方法
1.外泌体示踪
技术简介:利用亲脂性染料,PKH67、PKH26、DiI、DiO、DiD以及DiR等荧光染料对外泌体进行标记。
2.细胞增殖(CCK8/MTT法)
技术简介:常用MTT,CCK8检测,但CCK8细胞毒性相对较弱,应用相对于MTT来说更加广泛。
3.细胞凋亡(TUNEL/流式法)
技术简介:检测的方法一般使用流式细胞术,TUNEL染色以及可以用WB 检测凋亡相关蛋白的表达。
4.细胞自噬
技术简介:自噬是一个吞噬自身细胞质蛋白或细胞器并使其包被进入囊泡,并与溶酶体融合形成自噬溶酶体,降解其所包裹的内容物的过程。
- 透射电镜检测是否含有自噬体。
- WB或免疫荧光检测自噬相关蛋白的表达。
实验周期:3-6周(需依据实验方法及细胞状态而定)。
5.克隆形成
技术简介:测定单个细胞的增殖能力,包括平板集落形成实验、软琼脂集落形成实验
①.平板集落形成实验∶本法适用于贴壁生长的细胞和正常培育的细胞。
②.软琼脂集落形成实验:本法适用于悬浮细胞。
实验周期:3-6周(需依据细胞状态而定)。
6.细胞周期
技术简介:流式细胞仪检测与DNA结合的PI的荧光强度。
实验周期:3-8周(需要依据细胞状态而定)。
7.细胞迁移/侵袭
技术简介:
细胞体外迁移或侵袭实验通常用transwell实验,其目的在于检测细胞的运动及迁移能力。
公司优势
可靠性:实验均由经验丰富的技术人员操作,确保结果真实有效。
先进的设备:拥有流式细胞仪等科研需要的先进的设备。
一站式服务:方案设计,项目实施,结果整理,数据分析等一站式全方位服务。
外泌体作为细胞间通信的短距离和长距离纳米载体,具有许多生物学功能。它们允许细胞之间复杂信息的交换,从而在生理和病理条件下调节各种过程,例如体内稳态、免疫反应和血管生成。此外,由于它们具有独特的迁移、靶向和选择性内化进入特定细胞的能力,是非常有前途的传递载体。并且外泌体由于其优异的免疫原性使其极其适合异体实验,华然腾创在优异的外泌体提取基础上有着成熟的外泌体改造技术,提供动物外泌体的示踪以及其他小鼠相关实验服务。
服务项目
外泌体的体内示踪 通过对于外泌体的特定改造,使其注射入体内后可以被检测到去处,对于外泌体肿瘤靶向以及其他特定靶向研究有着重要意义。
图1.体内静脉注射DiR标记的外泌体,24H后进行成像
Wiklander OP et al. J Extracell Vesicles. 2015
动物肿瘤研究 通过外泌体载药并体内注射,研究抗肿瘤药物对于小鼠肿瘤的作用,适用于药物的研发以及药物递送研究。
小鼠在静脉内注射外泌体后,显示出在肿瘤位置的特异性积累。
Sushrut Kamerkar et al. JCI Insight. 2018.
动物发育研究 通过外泌体来特定的敲低、过表达目标基因,或通过外泌体递送物质来研究动物发育过程的变化,结合转录组学/蛋白组学/空间组学/代谢组学分析,寻找动物发育过程中关键靶基因。
动物要求 华然腾创可提供常见的C57BL/6、ICR、Balb/C、裸鼠等常见品系小鼠,若实验需求特定的疾病模型小鼠需实验方提供。
研究方案——Nanosting DSP 空间组学研究
Nanosting DSP 是新一代空间组学分析系统,具有靶向性强、灵活性高和多组学探索的特性。结合了免疫荧光、组织化学、蛋白组学及转录组学技术,可提供全面的生物信息解析。通过个性化定制试剂及自由圈选区域,可实现空间多组学精准分析。
Nanosting DSP通过在抗体或RNA上偶联DNA oligo的技术,使得每种抗体或RNA上拥有特殊标记,通过紫外照射手机DNA oligo后进行测序,可以得到精准定性定量分析。目前DSP可以做到全转录组测序,及1000多种蛋白测序,同时提供定制化服务,可由用户自行拓展及组合抗体。
技术优势
1.DSP提供多种试剂盒组合,包括肿瘤检测、细胞凋亡、信号通路等,满足多种实验需求
2.可进行全转录组测序,人类约为18000个基因,小鼠约为20000个基因,实现信息全面覆盖
3.适用于新鲜冷冻切片、FFPE标本、组织芯片TMA等多种样本类型,且可根据需求灵活确定ROI, 并且一张芯片上可放置多个样本,实现高度自由化检测。
对外泌体功能及机制进行整体方案规划,包括外泌体提纯、功能实验、机制研究、外泌体检测、外卖提提改造等,为客户提供完整的外泌体功能学研究服务。
研究模式
服务内容
产品优势
- 整体性 华然提供从外泌体分离到功能研究的全套服务,保证实验的完整性
- 个性化 根据客户需求,量身打造适合的外泌体研究方案,并进行验证
- 真实性 提供全部原始数据,保证数据的真实性及可重复性
- 价值高 申请国自然热门课题,对临床及治疗提供更多有价值的帮助