外泌体鉴定产品
电镜鉴定、纳米颗粒追踪分析、West Blot鉴定
通过扫描电镜(SEM)或透射电镜(TEM)直接观察到样品中单个外泌体的形态结构和粒径,对其实现鉴别,透射电镜分辨率高,可区分外泌体与非外泌体颗粒。外泌体在血浆及细胞上清中的分布形态如图所示。
检测仪器 扫描电子显微镜、透射电子显微镜
样本要求 BCA浓度300-400ng/pL ,体积 10µL ; 避免反复冻融,4。C:保存,冰袋运输。
纳米颗粒追踪分析技术(NTA )检测外泌体大小及数量。NTA技术处理样本简单,更能保证外泌体的原始形态。NTA应用激光通过三棱镜对外泌体样品 进行照射,使用显微镜追踪其在溶液中的布朗运动,收集颗粒的散射光信号,结Stockes-Einstein方程计算颗粒的大小及浓度,同时可检测单个外泌体颗粒的内源或外源性荧光信号。并可测量ZETA电位,电位越高,溶液中微 粒聚集沉淀的可能性越小。
检测仪器 Nanosight NS300
样本要求 BCA浓度>10ng/µL , 10µL外泌体原液;避免反复冻融。
结果呈现 外泌体的粒径分布、浓度信息,荧光标记的外泌体颗粒信息。
Western Blot测定外泌体表面特异性分子标志物,通过抗原抗体特异性结合,检测外泌体表面标志蛋白,利用外泌体表面抗 原递呈蛋白(如CD63、CD8、TSG101等)的优质单克隆抗体 提高鉴定结果的可靠性。
样本要求 浆样本BCA量60µg, >0.5ng/µL ;细胞上清BCA量40>0.5ng/µL ;冰袋运输。
项目周期 SEM+TEM + NTA + WB ; 14天
产品优势 严格按照MISEV2018的要求进行外泌体的鉴定。
总体表征 至少3个阳性(至少包括1个跨膜蛋白和1个细胞溶质蛋白)、1个阴性蛋白质标志物。
个体表征 电镜和纳米颗粒追踪分析两种方法互为补充。
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